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 RNA提取详细步骤及注意事项

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爱问共享资料RNA提取详细步骤及注意事项文档免费下载,数万用户每天上传大量最新资料,数量累计超一个亿 ,RNA提取高级生化与分子生物学研究技术.目录1、试剂介绍2、主要提取流程3、详细步骤4、注意事项.1、试剂介绍本实验室提取RNA常用的抽提剂是全式金Trizol。Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。Trizol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。.2、主要提取流程磨样加氯仿转移水相加乙醇室温晾干保存溶解RNA测浓度胶状物加Trizol去杂质.1、剪取新鲜幼嫩叶片,置于液...

RNA提取详细步骤及注意事项

RNA提取高级生化与分子生物学研究技术.目录1、试剂介绍2、主要提取 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 3、详细步骤4、注意事项.1、试剂介绍本实验室提取RNA常用的抽提剂是全式金Trizol。Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。Trizol

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在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化RNA及 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 化RNA的生产十分有用。.2、主要提取流程磨样加氯仿转移水相加乙醇室温晾干保存溶解RNA测浓度胶状物加Trizol去杂质.1、剪取新鲜幼嫩叶片,置于液氮中慢慢反复研磨,直至其成为合格粉末为止。2、加入1mlTrizol,晃动3-5下,再用枪吹打2-3下,确保

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全部裂解。3、室温放置5分钟,使样品充分裂解。12,000g、4℃离心10分钟。4、每毫升Trizol加入0.2ml氯仿,猛烈晃动15秒,室温放置2-3分钟。5、12,000g4℃离心15分钟,然后吸取上层无色水相至一新的离心管中。3、详细步骤.6、按1ml最初的Trizol加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀

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10分钟。7、12,000g、4℃离心10分钟,弃上清,在管底可见RNA沉淀(透明胶状)。8、每毫升最初的Trizol加入1ml75%乙醇(DEPC水配制),剧烈震荡。9、7,500g、4℃离心5分钟,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm,离心1分钟),小心吸尽液体。10、待RNA略干后,加入20µlDE

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PC水溶解,-80℃冻存。.4、注意事项1、所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可放置于150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。2、必须戴一次性口罩和一次性手套操作。尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防

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RNA酶污染。3、提取RNA整个过程中,尽量在低温下操作。.4、在操作中当加入变性剂氯仿后,须剧烈震荡,这样才能彻底使两相混匀。5、在提取核酸时,如样品浓度低,则应增加有机溶剂沉淀时间,-80℃下>30min或-20℃过夜将有助于增加核酸的沉淀量。6、切勿让RNA过分干燥,否则将难溶解。.谢谢老师的评阅!.

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